TAE怎么用？从配液到跑胶实操
TAE怎么用，真正容易出错的不是开电源，而是稀释倍数、胶液浓度和电场方向。实际操作中，只要坚持“胶里一种缓冲液、槽里同一种缓冲液”，再控制温度与电压，多数条带问题都能避开。下面按一次完整跑胶过程说明。
先把整套操作说清楚
TAE的用途，是在琼脂糖凝胶电泳中维持离子环境并让DNA稳定迁移。一次标准操作包括配1×工作液、用它制胶、向电泳槽加入同批缓冲液、上样和通电。胶与槽液浓度不一致，常会出现条带弯曲、迁移速度反常，后面再调电压也救不回来。
实操时我更建议先算总用量：制胶约需几十到几百毫升，电泳槽通常消耗更多。一次配足同批1×TAE，能减少批次差异。
配液和制胶怎么做
使用50×TAE时，配500毫升1×工作液，可取10毫升浓缩液，用纯水定容至500毫升。配1升则取20毫升，定容至1升。倒液前把瓶子轻轻混匀，看到沉淀或明显浑浊时先查保存要求，别直接拿来跑样本。
做1%琼脂糖胶，就是每100毫升1×TAE加入1克琼脂糖。加热至完全透明，间歇摇匀，避免突然暴沸；冷却到约55—60℃再倒胶。核酸染料是预染还是跑后染，要按具体产品说明操作，不能凭习惯乱加。
上样和运行的手感细节
凝胶凝固后放进槽内，加入1×TAE，以刚好没过胶面为宜。DNA带负电，应从负极向正极移动，所以加样孔要靠近负极。这个方向一旦放反，样本会直接跑出胶外，是新手最冤的一种失败。
电压应按两电极间距离计算，常用约5—8 V/cm，而不是只看电源显示的总伏数。发现槽液明显发热、气泡增多或条带呈笑脸状，先降电压并检查液面。赶时间猛加电压，通常换来的是分辨率下降。
用完后怎样收尾
跑到示踪染料进入合适位置后断电，再取胶观察。准备切胶回收时，尽量缩短紫外照射时间；有条件可用蓝光观察兼容染料，减少DNA损伤。含核酸染料的胶和缓冲液应按实验室规定分类处置，不能默认倒进水槽。
TAE怎么用的核心并不复杂：准确稀释、同液制胶、方向正确、温度可控。把这四件事守住，比追求某个固定电压更可靠。
常见问题
- 1%琼脂糖胶需要多少TAE？
- 制100毫升胶需要100毫升1×TAE和1克琼脂糖；此外还要另备足够的1×TAE覆盖电泳槽中的凝胶，具体体积由槽体尺寸决定。
- TAE跑胶时正负极怎么放？
- 加样孔靠负极，DNA向正极迁移。常见设备中黑色为负极、红色为正极，但仍应查看仪器标识，不能只凭线的颜色判断。
- TAE可以直接用50×原液跑胶吗？
- 不可以。50×原液离子强度过高，会导致大电流、严重发热并破坏分离效果，必须先稀释到1×工作浓度。